多重熒光免疫組化檢測（multiplex fluorescent immunohistochemistry，MF-IHC）是一種應用免疫學基本原理——抗原抗體反應的檢測方法。它采用TSA技術(shù)，又稱之為絡胺信號放大技術(shù)，通過多重熒光素共價偶聯(lián)的方法來檢測樣本中的多種蛋白質(zhì)。這種方法利用HRP催化后續(xù)添加的熒光素，使熒光素在HRP和過氧化氫的作用下被活化，跟臨近蛋白的酪氨酸殘基共價偶聯(lián)，使得蛋白樣品與熒光素穩(wěn)定的結(jié)合。最后通過微波處理，前一輪非共價結(jié)合的抗體被洗掉，共價結(jié)合的熒光素還殘留在樣品上，再進行第二輪的孵育。等到所有的抗體孵育結(jié)束以后，熒光素都結(jié)合好以后，最后對結(jié)果進行檢測。由于每一體系中都只有單一抗體孵育，因此無需要擔心抗體的交叉反應以及一抗二抗種屬匹配的問題，大大減少了實驗設計時不同種屬抗體選擇匹配的限制。
作用：
多重熒光免疫組化檢測在醫(yī)學和生命科學領(lǐng)域中有著廣泛的應用。它主要用于同時檢測多個生物分子標記物，例如蛋白質(zhì)、核酸、糖類等，從而實現(xiàn)對細胞和組織的深入分析。例如，在腫瘤領(lǐng)域中可以同時檢測腫瘤細胞的多個生物標志物，如PD-L1、TMB、基因表達譜等，以全面、客觀地分析患者的腫瘤微環(huán)境，幫助臨床預測腫瘤對治療的反應，為患者節(jié)省治療時間和治療成本。此外，免疫組化檢測還能全景展示和統(tǒng)計腫瘤不同區(qū)域免疫微環(huán)境內(nèi)各個組分的信息，有利于更加客觀的定性、定量評估各種細胞。
總的來說，多重熒光免疫組化檢測是一種強有力的工具，可以幫助我們更好地理解疾病的機制，發(fā)現(xiàn)新的治療靶點，提高疾病的診斷率和治療成功率。
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